【試薬調製ノート】MS培地貯蔵液

試薬調製ノート

Murashige & Skoog (MS)培地は植物組織培養に使用される培地の一つです。培地の調製を効率化するために、貯蔵液を作成しておくと便利です。

Googleで検索すると、4分割する貯蔵液の調製方法を見つけられると思いますが、ここでは、6分割で貯蔵液を調製する方法をまとめます。

https://www.jstage.jst.go.jp/article/kagakutoseibutsu1962/26/6/26_6_386/_pdf/-char/ja
https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1111/j.1399-3054.1962.tb08052.x

貯蔵液1(窒素・マグネシウム)

使用量

培地1L当たり 20ml

濃度

50倍液

主要成分
化合物必要量(1000ml)
NH₄NO₃(硝酸アンモニウム)82.5g
KNO₃(硝酸カリウム)95.0g
MgSO₄・7H₂O(硫酸マグネシウム)18.5g

100倍液にするとKNO₃が過飽和となり、低温貯蔵で沈殿が生じるため、50倍液とする。


貯蔵液2(カルシウム)

使用量

培地1L当たり 10ml

濃度

100倍液

主要成分
化合物必要量(500ml)
CaCl₂・2H₂O(塩化カルシウム二水和物)22.0g

貯蔵液3(リン酸)

使用量

培地1L当たり 10ml

濃度

100倍液

主要成分
化合物必要量(500ml)
KH₂PO₄(リン酸二水素カリウム)8.5g

貯蔵液4(鉄キレート液)

使用量

培地1L当たり 10ml

濃度

100倍液

主要成分
化合物必要量(1000ml)
Na₂-EDTA(エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム)3.73g
FeSO₄・7H₂O(硫酸第一鉄七水和物)2.78g
Fe-EDTAを使用する場合:4.21g

混合後、100℃の湯浴で10分間加熱するとキレート形成が確実に行われる。


貯蔵液5(微量要素)

使用量

培地1L当たり 10ml

濃度

100倍液

主要成分
化合物必要量(1000ml)
H₃BO₃(ホウ酸)620mg
MnSO₄・4H₂O(硫酸マンガン四水和物)2230mg
ZnSO₄・7H₂O(硫酸亜鉛七水和物)860mg
KI(ヨウ化カリウム)83mg
Na₂MoO₄・2H₂O(モリブデン酸ナトリウム二水和物)25mg
CuSO₄・5H₂O(硫酸銅五水和物)2.5mg
CoCl₂・6H₂O(塩化コバルト六水和物)2.5mg

秤量の工夫

  • モリブデン酸ナトリウムは 2倍量 を計量し、溶解後半量を使用。
  • 硫酸銅・塩化コバルトは 20倍量 を計量し、溶解後1/20量を使用。

貯蔵液6(ビタミンおよび補助成分)

使用量

培地1L当たり 10ml

濃度

100倍液

主要成分
化合物必要量(500ml)
ミオイノシトール5g
グリシン100mg
ニコチン酸25mg
ピリドキシン塩酸塩25mg
チアミン塩酸塩5mg

小分けして凍結保存する。

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